更新時(shí)間:2023-05-31
細胞炎癥因子檢測試劑盒通?;诿嘎?lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA)原理。該試劑盒包括特異性抗體和標記物,用于檢測樣本中的炎癥因子水平。
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
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應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
細胞炎癥因子檢測試劑盒?采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被細胞炎癥因子試劑盒捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞炎癥因子呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
細胞炎癥因子檢測試劑盒通?;诿嘎?lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA)原理。該試劑盒包括特異性抗體和標記物,用于檢測樣本中的炎癥因子水平。在ELISA中,樣本被加入到涂有特異性抗體的微孔板中,并與這些抗體結合。隨后,標記物被加入到微孔板中,并與未結合的特異性抗體結合。通過(guò)加入底物產(chǎn)生化學(xué)反應,可以測量標記物的信號強度,從而確定樣品中炎癥因子的濃度。
一、試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片 | 2片 | |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
二、樣本處理要求:
1. 樣本應從患者采集后立即處理,以避免因延遲處理而導致結果失真。
2. 樣本可以是血液、血清、血漿或組織等生物體內的液體或組織。
3. 樣本應在低溫條件下保存,以避免因長(cháng)時(shí)間儲存而導致樣本降解。
4. 樣本應避免多次凍融循環(huán),以避免因多次凍融而導致樣本降解。
5. 樣本應根據試劑盒說(shuō)明書(shū)的指導進(jìn)行前處理和稀釋。
6. 操作人員應穿戴手套、口罩等個(gè)人防護裝備,并按照操作規范進(jìn)行樣本處理。
總之,樣本處理需要保證樣本的質(zhì)量和純度,以確保能夠得到可靠的檢測結果。
三、操作步驟:
1. 樣品處理:將待測樣品如血清、血漿或培養上清等加入試劑盒提供的孔板中。
2. 孔板處理:根據試劑盒說(shuō)明書(shū)中所示方法,對孔板進(jìn)行洗滌和添加輔助試劑等處理,以保證測定的準確性和精度。
3. 加入檢測試劑:在處理完孔板后,向每個(gè)孔加入特定的檢測試劑,如酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(ELISA)中的抗體或底物等。
4. 孵育:將孔板置于適宜的溫度下(一般為37℃),靜置一定時(shí)間,使檢測試劑與待測樣品中的分子發(fā)生特異性作用。
5. 洗滌:將孔板中未與檢測試劑結合的雜質(zhì)物洗去,以避免誤差的出現。
6. 信號檢測:對加入檢測試劑的孔,進(jìn)行信號檢測,常見(jiàn)的包括熒光法、吸收法、放射免疫分析法等。
7. 數據分析:根據檢測儀器所測得的信號值,參照試劑盒說(shuō)明書(shū)中的標準曲線(xiàn),計算出待測樣品中特定分子的含量,并進(jìn)行數據分析。
需要注意的是,具體的操作步驟可能會(huì )因為不同的試劑盒而有所差異,因此在使用前,一定要仔細閱讀試劑盒說(shuō)明書(shū),并按照說(shuō)明書(shū)中的方法進(jìn)行操作。
四、注意事項:
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
2、濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。
3、各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間建議控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4、請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),建議做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9、本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準。