更新時(shí)間：2023-05-30
動(dòng)植物疫病ELISA試劑盒免費代測[ 檢測目的 ]用于測定血清、血漿、組織、尿液、及相關(guān)液體等樣本[ 適用范圍 ]僅供科研，不用于臨床[ 貯存方式 ]2-8℃，六個(gè)月我司專(zhuān)業(yè)提供免疫學(xué)產(chǎn)品，ELISA試劑盒?？商峁?shí)驗外包，技術(shù)指導，操作指導，代做實(shí)驗，代做課題等技術(shù)服務(wù)，凡在我公司購買(mǎi)相關(guān)試劑的客戶(hù)，均可享受代做實(shí)驗超低折扣，elisa試劑盒，免費代測，實(shí)驗現場(chǎng)觀(guān)摩等優(yōu)惠活動(dòng)。
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領(lǐng)域 | 醫療衛生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農業(yè),制藥 |
動(dòng)植物疫病ELISA試劑盒免費代測
用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中濃度。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標板上，實(shí)驗時(shí)樣品或標準品中的抗原會(huì )與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過(guò)氧化物酶標記的親和素?？贵w與結合在包被抗體上的抗原結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長(cháng)處測OD值，抗原濃度與OD450值之間呈正比，通過(guò)繪制標準曲線(xiàn)計算出樣品中指標的濃度。
| 反應類(lèi)型 | 夾心法 |
| 規格 | 96T |
| 反應時(shí)間 | 4.5h |
| 反應性 | 通用 |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 靈敏度 | 檢測下線(xiàn)除以10 |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類(lèi)型 | 血清、血漿或其他相關(guān)生物液體 |
| 特異性 | 可檢測樣本中的指標,且與其它相關(guān)蛋白無(wú)明顯交叉反應 |
| 重復性 | 板內，板間變異系數均<10% |
樣品活化方法
生物樣品中的通常以無(wú)活性的形式存在，在檢測指標活性前必須進(jìn)行活化處理。
活化方法如下：
血清、血漿： 280 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品，混勻，加入40 μL活化試劑1，室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2，混勻后立即檢測。
注意：樣品被稀釋了10倍！
細胞培養上清：20 μL標準品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品，混勻，加入40 μL活化試劑1，室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2，混勻后立即檢測。
注意：樣品被稀釋了2倍！
組織勻漿：1960 μL標準品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品，混勻后檢測。
注意：樣品被稀釋了50倍！
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| 批內變異系數 | 批間變異系數 | |||||
| 樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 數量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| 平均值( MERGEFIELD 單位ng/mL) | 0.41 | 1.07 | 4.96 | 0.47 | 1.25 | 4.24 |
| 標準差 | 0.02 | 0.05 | 0.22 | 0.03 | 0.06 | 0.2 |
| 變異系數 (%) | 4.88 | 4.67 | 4.43 | 6.38 | 4.8 | 4.72 |
回收率
分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實(shí)驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| 樣本類(lèi)型 | 回收率范圍 (%) | 平均回收率 (%) |
| 血清(n=5) | 94-110 | 102 |
| 血漿(EDTA)(n=5) | 90-102 | 96 |
| 細胞上清(n=5) | 95-106 | 98 |
線(xiàn)性
分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實(shí)驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗，得出回收率范圍及平均回收率。
| 血清(n=5) | 血漿(EDTA)(n=5) | 細胞上清(n=5) | ||
| 1:2 | 回收率范圍(%) | 99-108 | 95-105 | 92-104 |
| 平均回收率(%) | 105 | 102 | 97 | |
| 1:4 | 回收率范圍(%) | 95-109 | 90-100 | 97-105 |
| 平均回收率(%) | 102 | 96 | 100 | |
| 1:8 | 回收率范圍(%) | 89-103 | 89-104 | 96-108 |
| 平均回收率(%) | 97 | 97 | 102 | |
| 1:16 | 回收率范圍(%) | 88-102 | 98-108 | 92-105 |
| 平均回收率(%) | 94 | 104 | 100 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在4℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開(kāi)試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 |
| 封板膜 | 2片 | 2片 |
| 密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
| 酶標包被板 | 1×48 | 1×96 |
| 標準品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 |
| 酶標試劑 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 |
| 樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
| 顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
| 顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
| 終止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
| 20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 |
| 試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 | 1份 |
| 封板膜 | 2片 | 2片 |
| 密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
說(shuō)明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實(shí)際發(fā)貨版說(shuō)明書(shū)為準。相關(guān)試劑在分裝時(shí)會(huì )比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時(shí)量取而非直接倒出。
動(dòng)植物疫病ELISA試劑盒免費代測
操作步驟
1. 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。
4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
9. 測定：以空白孔調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
試驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長(cháng)濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
我司試劑盒優(yōu)勢體：
品種齊全 ： 可以檢測人、小鼠、大鼠和豬的各種細胞因子
操作簡(jiǎn)單 ： 大多數試劑盒可以在3小時(shí)內完成檢測
節約樣品 ： 絕大多數試劑盒的單孔樣品量只需50μl
應用廣泛 ： 適用于細胞培養上清液、血清、胞漿和尿液等多種樣品
包裝多樣 ： 除了1塊板的包裝，很多品種還提供2塊板和5塊板的經(jīng)濟裝
超級靈敏 ： 有些試劑盒采用先進(jìn)檢測技術(shù)，靈敏度高
特異性高 ： 進(jìn)行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應和干擾導致的實(shí)驗數據誤差
